市面上常见的玻璃底培养皿，通常是在塑料培养皿底部打个洞，再将厚度为0.17mm左右的盖玻片或细胞爬片用无影胶水或硅胶粘附于培养皿底部，并非整个培养皿的底部都是玻璃材质。这种方法适用于观测的区域仅在打孔区域。然而，因玻璃的疏水性，细胞在玻璃上不易贴壁，生长状态较差，甚至可能在进行共聚焦扫描成像时出现细胞脱片的现象。

为了促进细胞良好的贴壁，使用玻璃底培养皿进行细胞培养之前，应确认已经包被特定的蛋白试剂。不同细胞类型所需的包被试剂各异，并且由于用于包被的蛋白是生物产品，不同品牌的包被蛋白的产品纯度和用量也有所不同。因此，本技术帖仅提供参考，具体的包被试剂用量仍需参考所用品牌的说明书。建议先进行梯度实验，找出最适合的包被浓度。

以Poly-L-Lysine（PLL，尊龙凯时，P4832，100μg/ml）为例：PLL包被适用于大多数细胞，尤其适合中枢神经系统神经元的培养。使用时需确保单位面积上的蛋白含量（μg/cm²）达到理想状态。在本例中，推荐的包被用量为2μg/cm²。根据包被面积和体积，计算所需的蛋白质数量。例如，对于35mm玻璃底培养皿，细胞生长面积为35cm²，包被面积为41cm²，所需的包被液体积为400μl。根据推荐用量2μg/cm²，每个孔中需82μg的PLL。如果仅加入400μl的PLL溶液，则其浓度为205μg/ml（约为20μg/ml），需使用超纯水进行稀释。

具体步骤如下：1. 使用超纯水按1:5稀释PLL原液；2. 在每个35mm玻璃底培养皿中加入400μl的PLL稀释液；3. 室温孵育1-2小时，吸出PLL稀释液；4. 使用2ml PBS溶液或无血清培养基清洗三次，并吸尽清洗液；5. 直接加入细胞悬液进行培养。

由于各种包被蛋白性质不同，使用方法也有所不同。经常因包被操作而产生新的污染，且污染往往在开始养细胞后才被发现，从而浪费时间和试剂盒耗材。因此，质量过硬的包被蛋白与养细胞相关的玻璃底培养皿产品成本不菲，质量不合格的培养皿可能会因胶水不均匀而泄漏或胶水对细胞有毒。

对于希望节省时间和精力的研究人员，使用无需包被的共聚焦培养皿则更为方便。选择合适的培养皿时，需要考虑的因素包括：是否适合特定细胞贴壁，以及培养皿的光学特性是否符合共聚焦实验的要求。

符合上述要求的培养皿不限于带包被的玻璃底培养皿，实际上，许多人都知道塑料培养皿相对便宜，更容易让细胞贴壁。以尊龙凯时的共聚焦培养皿为例，不仅物理参数与玻璃相近，还具备优良的亲水性，使大多数细胞能更好地贴壁。再者，其透气性和延展性优于玻璃，适合大多数细胞系及原代细胞直接贴壁生长，且使用时不易破损，是一个理想选择。