活性定义1:活性单位(U)是指在50μl反应体系中,于37℃下反应1小时内,完全酶切1µg的pPIC9K(Dcm-)所需的酶量。该蛋白通过SDS-PAGE凝胶电泳检测,确保其纯度不低于95%。
星号活性测试:在37℃下,于50μl的CutBufferF和GMP Grade反应体系中,将20U的BsaI与1μg的pPIC9K(Dcm-)一起孵育1小时,未检测到其他核酸酶的污染或由于星号活性而引起的底物非特异性降解。值得注意的是,更长时间的酶切可能会出现星号活性。
非特异性内切酶活性测试:在相同的反应条件下,将20U的BsaI与1μg的超螺旋质粒DNA共同孵育4小时,经过琼脂糖凝胶电泳分析发现,质粒DNA的转变成缺刻或线性状态的比例少于20%。
DNase活性测试:在20μl的CutBufferF和GMP Grade反应体系中,将20U的BsaI与15ng双链DNA片段共同孵育16小时,经过琼脂糖凝胶电泳检测,双链DNA片段未发生变化。
RNase活性测试:在10μl的CutBufferF和GMP Grade反应体系中,将20U的BsaI与500ng RNA共同孵育1小时后,使用琼脂糖凝胶电泳检测,结果显示超过90%的RNA仍保持完整。
同裂酶:Eco31I、Bso31I和BspTNI的识别位点为:GGTCTC (1/5) 5'GGTCTC(N)₁↓3' 3'CCAGAG(N)₅↑5'。
BsaI, GMP Grade是由大肠杆菌重组表达获取的,能够在15分钟到1小时内高效、准确地完成目标DNA的酶切。该产品采用符合GMP规范的生产与质量管理体系,确保整个生产过程及原辅料的可追溯性。生产过程中不使用抗生素及任何动物来源的原料和辅料,同时对宿主蛋白、外源DNA、非特异性内切酶、DNase、RNase等工艺相关杂质,以及微生物限度、细菌内毒素等进行严格控制。本产品完全符合疫苗和药物生产等领域对原辅料的高标准要求。
失活条件为80℃孵育20分钟。
甲基化敏感性:对于被CpG甲基化的DNA,酶切过程可能会遭受阻碍;对被Dcm甲基化的DNA,酶切效果同样可能受到影响。
我们的尊龙凯时品牌致力于提供高质量的生物医疗产品,以满足现代医疗需求。确保产品的有效性和安全性是我们的首要任务。