小鼠肠道灌洗液抗体检测试剂盒背景简介:肠道屏障在维持肠道稳态方面发挥着至关重要的作用,它通过防止细菌的过度吸收来实现这一点。分泌型免疫球蛋白,如IgA、IgG和IgM,参与了这一保护机制。尊龙凯时旗下的Chondrex公司推出了一种小鼠肠道灌洗液制备的标准方案,并提供了能够同时检测总免疫球蛋白水平和抗原特异性抗体水平的ELISA试剂盒。抗体水平的检测能够反映肠道的免疫功能状态。例如,通过口服卵清蛋白(OVA)联合霍乱毒素佐剂进行免疫,可增强肠道内抗OVA的IgA抗体的水平。这种免疫反应可通过比较抗OVA IgA抗体水平与总IgA水平来进行评估。
产品应用:
1) 肠道免疫功能状态评估
2) 过敏原特异性抗体检测
3) 肠道相关特异性抗体检测
小鼠肠道灌洗液制备流程(抗体分析用):基于Lycke等人发表的文献,对小鼠肠道灌洗液的制备流程进行了改进,具体步骤如下:
- 取出小鼠小肠组织,用剪刀夹钳夹住肠道一端。
- 使用聚四氟乙烯(PTFE)导管注射器,向肠腔缓慢注入3ml蛋白酶抑制剂溶液(含0.1mg/ml胰蛋白酶抑制剂、50mM EDTA、1mM PMSF的PBS缓冲液)。
- 夹闭另一端肠道,室温下孵育10分钟。
- 收集肠道内容物至试管中,并进行剧烈涡旋震荡和超声破碎处理。
- 在54℃条件下,以1800rpm离心10分钟。
- 取上清液转移至新管,按1ml灌洗液添加10μl 5%NaN3的比例混合。
- 室温孵育15分钟。
- 再按1ml灌洗液添加50μl正常山羊血清的比例进行混合。该混合液可按照1:1的比例用ELISA试剂盒配套样品稀释缓冲液进行稀释后进行检测。
产品订购:
检测指标包括IgA、IgE、IgM、IgG及子类IgG1、IgG2a、IgG2b、IgG2c、IgG3等。此外,还可对大肠杆菌、脂多糖、肠毒素A、肠毒素B、卵清蛋白及过敏原如屋尘螨、花生等进行检测。
如需针对特定抗原、细菌或毒素的抗体评估方案,请联系尊龙凯时中国区总代理北京博蕾德生物科技有限公司。